Пренатальная диагностика мышечной дистрофии и спинальной мышечной атрофии за последние 4 года и эффективности существующей методологии пренатальной диагностики в Республике Молдова

IMSP Institutul Mamei şi Copilului Centrul de Sănătate a Reproducerii şi Genetică MedicalăIntroduction. The severity of hereditary diseases is already well known throughout the world. The monitoring and prevention of hereditary diseases are the current tasks of medical genetics and health. Prenatal diagnosis (PD) is one of the methods proposed to prevent the birth of children with congenital malformations incorrigible, monogenic and chromosomal pathologies. Muscular dystrophy Duchenne / Becker and spinal muscular atrophies are neuromuscular hereditary X-linked and respectively autosomal recessive disorders and that are frequently encountered in Moldova and can be detected through prenatal diagnosis. Materials and methods. The research was held in the scientific department of the Centre for Reproductive Health and Medical Genetics, Laboratory of Human Molecular Genetics. After medico-genetic consultation pregnant women who are at risk of having a pregnancy affected by a hereditary disease, namely Duchenne and Becker muscular dystrophy (DMD/B) and spinal muscular atrophy (SMA) undergo prenatal diagnosis (PD), which Moldova is achieved by methods such as multiplex PCR, PCR / RFLP, the primer sets specific and polymorphic sites. Purpose. The purpose of the work is to present data of prenatal diagnosis of neuromuscular disorders with high frequency in Moldova during the last four years. Results. In total were performed 14 prenatal diagnoses: 9 - DMD/B and 5 for SMA during 2011-2014. Making the prenatal diagnosis of DMD/B and SMA has allowed the direct analysis of deletions or RFLP test and were detected 4 affected fetuses, 3 of them were with DMD / B and 1 with SMA. Have been analyzed the strategies for prenatal diagnosis of these diseases in different countries and their methods. Conclusions. Prenatal diagnosis is an important strategy and an effective way to prevent the birth of children with hereditary monogenic diseases in families at risk. This strategy applies to all populations, but with different methodologies. The methods of modern molecular genetic prenatal diagnosis raise the efficiency and precision to 98%. The efficiency of prenatal diagnosis in Moldova is 71,4%. Analyzing different diagnostic methods used in the world was proposed as the method which will be better implemented in Moldova.Введение. Тяжесть наследственных заболеваний хорошо известна во всем мире. Лечебно-диагностические стратегии и методы анализируются и затем ставятся акценты в их развитии. Ключевой особенностью является неравномерного их распределение. Мониторинг и предотвращение наследственных заболеваний являются текущими задачами медицинской генетики. Пренатальная диагностика (ПД) является главным методом предотвращения рождения детей с моногенной и хромосомной патологии. Миодистрофия Дюшенна / Беккера и спинальная мышечная атрофия являются наследственными нервно-мышечными болезнями, которые часто встречаются в Р. Молдова и проведение ПД этих заболеваний возможно в нашей стране. Материалы и методы. Исследования проводились в научном отделе Центра Репродуктивного Здоровья и Медицинской Генетики, в лаборатории молекулярной генетики человека. После медико-генетического консультирования беременных женщин с высоким риском наследственных болезней, а именно МДД/Б и СМА проводится ПД. Мультиплексная ПЦР и анализ сцепления (ПЦР- ПДРФ) используются в Республике Молдова. Цель. Анализ результатов пренатальной диагностики, проведенных за последние четыре года в Лаборатории молекулярной генетики человека и оценка эффективности ПД в РМ. Результаты. В течение 2011-2014г. было сделано 14 пренатальных диагностических тестов: 9ПД на МДД/Б и 5 на СМА. Используя прямой поиск протяженных делеций методом МПЦР и анализ сцепления (ПЦР- ПДРФ) позволило выявить 4 плода с наследственными болезнями: 3 плода с МДД/Б и одного c СМА. Проанализировано стратегии и методы ПД, использующиеся в разных странах в настоящее время и проведен анализ эффективности применения существующих методов ПД в РМ. Эффективность составляет 71,4%. Выводы. Пренатальная диагностика является важной стратегией и эффективным способом предотвратить рождение детей с наследственными моногенными заболеваниями. Стратегия ПД применяется во многих популяциях, но с использованием различных методов. Применение молекулярно-генетических методов при современной ПД повышает эффективность и точность до 98% по данным литературы, но эффективность ПД в РМ составляет 71,4%. Предложены современные молекулярно-генетические методы ПД, которые повысят эффективность и точность ПД

Нарушение в генах фолатного и метионинового цикла у женщин с привычным невынашиванием беременности

ISMP Institutul Mamei şi Copilului, Centrul de Sănătate a Reproducerii şi Genetică MedicalăBackground: Pathogenesis in recurrent pregnancy loss (RLP) is complex and involves the interaction of multiple genetic and environmental factors. Is supposed that genetic polymorphisms in MTHFR (C677T and A1298C), MTR (A2756G) and MTRR (G66A) genes may be associated with the risk of recurrent pregnancy loss. In this study, we aimed to investigate the association between the polymorphism of MTHFR, MTR, MTRR genes and pregnancy loss. Methods: In this study, we determined the genotypic frequencies of the MTHFR, MTR, MTRR gene polymorphisms in a sample of 274 women from Moldova, 166 with 2 and more miscarriages and 108 without a history of miscarriages, with 2 healthy births. The genomic DNA was extracted from the peripheral blood collected on EDTA. The methods used to study polymorphisms were PCR and PCR-RFLP. Statistical analysis was performed using the www.gen-exp.ru site. Results: The results of this study showed that women with recurrent pregnancy loss have a higher proportion of the MTHFR677TT, MTHFR 677CT, MTR2756AG, MTRR66GG genotype compared with the control group, does not present significant differences between the study group and control (p>0.05). The test Hardy-Weinberg was applied for the control and research group. Have been established no statistically significant differences (p>0.05) between the observed and theoretically expected genotypic frequencies for MTHFRC677T, MTHFR A1298C, MTR A2756G polymorphisms, but for MTRR G66A polymorphism have found the Hardy-Weinberg disequilibrium in control and research groups (χ2 =22.81, p=0.000, respectively χ2 =28.31, p=0.000). Conclusion: Our study revealed the role of folate and methionine cycle genes polymorphisms (MTHFR, MTR, MTRR) in the etiology of recurrent pregnancy loss showed no correlation between the results obtained from the two groups (χ2 0.05), but the risk of pregnancy loss is higher for women carrying MTR 2756AG genotype, OR=1.38, 95% CI [0.81-2.34], as well as MTRR 66AA genotype (OR=1.19, 95% CI [0.21-6.59]).Актуалъностъ: Патогенез привычного невынашивания беременности (ПНБ) сложный и включает взаимодействие нескольких генетических и экологических факторов. Предполагается, что генетические полиморфизмы в генах MTHFR (C677T и A1298C), MTR (A2756G) и MTRR (G66A) могут быть связаны с риском ПНБ. В этом исследовании, мы изучали корреляции между этими полиморфизмами и ПНБ. Методы: Определялись генотипические частоты полиморфных генов MTHFR, MTR, MTRR у 274 женщин из Молдовы, из которых 166 женщин с двумя и > потерями и 108 без потерь с 2 нормальными родами. Геномную ДНК экстрагировали из периферической крови. Были использованы следующие молекулярно-генетические методы: PCR и PCR-RLFP. Статистическая обработка с использованием сайта www.gen-exp.ru. Результаты: Результаты данного исследования показали, что женщины с привычным невынашиванием имеют более высокую долю MTHFR677TT, MTHFR 677CT, MTR 2756AG, MTRR 66GG генотипа по сравнению с контрольной группой, но данные величины не являются статистически значимыми (р>0,05). Тест Харди-Вайнберга был проведён в группе исследуемой и контрольной группе и при сравнении наблюдаемых генотипических частот и теоретически ожидаемым для MTHFR C677T, MTHFR A1298C, MTR A2756G, не было выявлено статистически значимых различий (р>0,05), но для полиморфизма MTRR G66A наблюдалось статистически значимое отклонение от распределения Харди-Вайнберга в исследуемой и контрольной группе (χ2 =22,81, р=0,000, соответственно χ2 =28,31, р=0,000). Выводы: Исследование не выявило существенных различий между частотами генотипов в двух исследуемых группах (χ2 0,05), но риск ПНБ выше в 1,5 раза для женщин, несущих MTR 2756AG генотип, OR=1.38, 95% CI [0.81-2.34], а также несущих MTRR 66AA генотип (OR=1.19, 95% CI [0.21-6.59])

Эпидемиология гастроэзофагеальной рефлюксной болезни в Республике Молдова

Department of Internal Medicine, Department of Family Medicine, Nicolae Testemitanu State Medical and Pharmaceutical University, Congresul III al Medicilor de Familie din Republica Moldova, 17–18 mai, 2012, Chişinău, Republica Moldova, Conferinţa Naţională „Maladii bronhoobstructive la copii”, consacrată profesorului universitar, doctor habilitat Victor Gheţeul, 27 aprilie, Chişinău, Republica MoldovaFor the first time, in RM was made an epidemiologic study according to an ESGERD Epidemiologic Study of the Gastro Esophageal Reflux Disease. There were interviewed 1820 respondents, according to the questionnaire from Mayo Clinic. In the study participated 679 men and 1 141 women with the age between 16 and 79 years old. It was evaluated that in RM, the peruses as a symptom of GERD, is very frequent: at least once per month – 53, 7%, frequently – 17, 4% cases and for 6.2% patients this symptom was permanent.В первый раз в Республике Молдова было проведено эпидемиологическое исследование гастроэзофагеальной рефлюксной болезни (в соответствии с ESGERD – эпидемиологические исследования желудочноэзофагеальной рефлюксной болезни). В обследование было включено 1 820 респондентов, опрошенных в соответствии с вопросником из клиники Майо. В исследовании приняли участие 679 мужчин и 1 141 женщин в возрасте от 16 до 79 лет. Оценивалась изжога – как часто встречаемый симптом ГЕРБ: один раз в месяц – 53,7%, часто – 17,4% случаев и у 6,2% пациентов этот симптом был постоянным

Наследственная тромбофилия, как одна из основных причин невынашивания беременности

Instituţia Medico-Sanitară Publică Institutul Mamei și Copilului, Universitatea Academiei de Ştiinţe a MoldoveiMiscarriage is considered one of the most common gestational complications and a major problem of contemporary society. Pregnancy losses have multiple causes, while thrombophilic complications have a higher percentage. In the last decade, the research of hereditary thrombophilia associations with miscarriages has increased considerably and recently thrombophilia has been postulated as a cause of recurrent pregnancy loss (RPL). The research design was constructed as a case-control type. The case group was represented by 274 patients with reproductive losses and the control group by 68 patients with two or more births. The aim of this study was to identify genetic factors that lead to the formation of thrombosis (F2 G20210A, G1691A F5, VKORC1 C1173T, and G1639A VKORC1), involved in fibrinolysis (PAI-1 4G / 5G), and their association with reproductive disorders. Odds ratio analysis revealed that mutation G1691A of F5 gene (Leiden mutation) (OR 6.86, 95%CI 0.90, 52.48, p0.05) were associated with two or more reproductive loss being a major risk factor for normal development of pregnancy. It was determined that the gene polymorphism of plasminogen activator inhibitor (PAI-1 4G/5G), which regulates the fibrinolysis process does not influence the normal course of pregnancy. VKORC1 gene is responsible for the activation of vitamin K and therefore would indirectly influence blood homeostasis. A study of VKORC1 gene polymorphisms (C1173T, G1639A) revealed an association of homozygous genotype (T1173T, OR 3.26, 95%CI 1.07, 9.91, p>0.05) with increased risk of complications during pregnancy. Obtain results emphasize the necessity of hereditary thrombophilia molecular screening in women with RPL.Актуальность. Не вынашивание беременности является одним из самых распространенных осложнений гестационного периода и главной проблемой современного общества. Выкидыши имеют несколько причин, из которых значительная часть принадлежит к тромбофилическим осложнениям. Научная деятельность последних 10 лет в области ассоциации тромбофилии и не вынашивания беременности у женщин заметно увеличилось, а недавно тромбофилия была постулирована как причина выкидышей (RPL). Данное исследование проведено по типу случай-контроль в которой участвовали 274 женщин, включенных в группу больных и 68 женщин из контрольной группы. Цель изыскания заключалась в изучении молекулярно-генетических факторов, которые приводят к тромбообразованию (F2 G20210A, G1691A F5, VKORC1 C1173T и G1639A VKORC1); к нарушению фибринолиза (PAI-1 4G/5G), и их связь с репродуктивными расстройствами. Результаты анализа Odd Ratio мутаций G1691A (Leiden) из гена F5 (OR 6.86, 95% CI 0,90, 52,48, р <0,05) и G20210A (OR 2,18, 95% CI 0,26, 18,13, р> 0,05) из гена F2 показали ассоциацию с двумя или более выкидышами, будучи основным фактором риска для нормально протекающей беременности. Было установлено, что полиморфизм гена ингибитора активатора плазминогена (PAI-1 4G/5G), который регулирует фибринолиз, не влияет на нормальный ход беременности. Ген VKORC1 имеет функцию активации витамина К и, следовательно, может косвенно влиять на гомеостаз крови. Анализ полиморфных вариантов C1173T и G1639A гена VKORC1 показал, что гомозиготный генотип по мутантный аллель T1173T ассоциирован с повышенным риском осложнений во время беременности (OR 3,26, 95% CI 1,07, 9,91, р>0,05). Выводы. Полученные результаты подчеркивают необходимость молекулярного скрининга факторов наследственной тромбофилии у женщин с повторными выкидышами

Гастро-эзофагиальная рефлюксная болезнь: атипичные клинические проявления и влияние на качество жизни больных

Spitalul Clinic al Ministerului Sănătăţii, Chişinău, Catedra Medicină internă nr. 6, USMF „Nicolae Testemiţanu”, Spitalul Feroviar, Chişinău, Conferinţa Ştiinţifico-Practică „Medicina modernă, actualităţi şi perspective”, consacrată aniversării de 40 de ani ai Spitalului Clinic al Ministerului Sănătăţii, 27-28 mai, 2010, Chişinău, Republica MoldovaIn this work data are presented about the influence of gastro-esophageal reflux disease on patient’s lifestyle, having an obscure evolution, but sometimes with severe atypical evolution and complications (hemorrhages, perforations, esophageal cancer) which may lead to death.В настоящем обзоре литературы приводятся данные о влиянии гастро-эзофагиальной рефлюксной болезни на качество жизни больных, которая может протекать со стертой клинической картиной, а иногда с тяжелым атипичным течением и развитием различных тяжелых осложнений (кровотечения, перфорации, рак пищевода) приводящих к смерти

Определение концентрации метаболитов окиси азота в желудочном соке у больных с рефлюксной болезнью

Department of Internal Medicine, Department of Family medicine, Nicolae Testemitanu State Medical and Pharmaceutical University, Congresul III al Medicilor de Familie din Republica Moldova, 17–18 mai, 2012, Chişinău, Republica Moldova, Conferinţa Naţională „Maladii bronhoobstructive la copii”, consacrată profesorului universitar, doctor habilitat Victor Gheţeul, 27 aprilie, Chişinău, Republica MoldovaIntroducere. În ultimii ani, o atenţie mare se acordă rolului oxidului nitric (NO) în patogeneza diverselor patologii, inclusiv ale tractului gastrointestinal. NO joacă un rol important în procesele fiziologice şi patologice la nivelul tractului digestiv [1]. În organismul uman NO rezultă din reacţia de transformare a L-argininei în L-citrulină, proces catalizat de NOS. Produsele finale ale NO în organism, formate prin reacţia de oxidare, sunt nitriţii (NO2 ) şi nitraţii (NO3 ) [2, 4]. Oxidul nitric este un mediator de protecţie a mucoasei gastrice, reglează motilitatea canalului digestiv, microcirculaţiei regionale, posedă acţiune citoprotectoare [2]. Cantitatea excesivă de oxid nitric se poate conjuga cu oxigenul, formând peroxinitrit, astfel provocând procese inflamatorii în stomac, pancreas, intestin [3]. Rolul oxidului nitric în afecţiunile acidodependente este bazat pe determinarea metaboliţilor lui în serul sanguin, iar interesul clinic este direcţionat spre studierea concentraţiei metaboliţilor oxidului nitric în sucul gastric. Având în vedere că acest compartiment este insuficient elucidat, noi ne-am pus ca scop de a determina nivelul metaboliţilor oxidului nitric în sucul gastric la pacienţii cu boala de reflux gastroesofagian, în dependenţă de gradul de severitate al maladiei. Material şi metode În studiu au fost incluşi 20 de pacienţi cu BRGE, dintre ei 11 cu BRGE non-erozivă şi 9 pacienţi cu BRGE, formă erozivă. Vârsta medie a constituit 38,8 ani. Diagnosticul a fost confirmat în baza datelor clinico-anamnezice şi a explorărilor instrumentale (FEGDS). Modificările concentraţiei metaboliţilor NO au fost evaluate prin cercetarea în sucul gastric. Grupul de control a constat din 12 subiecţi sănătoşi, care nu prezentau acuze la moment şi au fost supuşi examenului endoscopic cu prelevarea sucului gastric. Nivelul de metaboliţi NO în sucul gastric a fost determinat prin metoda colorimetrică. Rezultate şi discuţii Analizând concentraţia metaboliţilor oxidului nitric în sucul gastric constatăm că la persoanele sănătoase ea constituie 27,9 µmoli/l. Pacienţii care suferă de BRGE au un conţinut de metaboliţi ai oxidului nitric mai înalt. Astfel, în grupul de pacienţi cu BRGE non-erozivă acest indice constituie 46,15 ± 1,31 µmoli/l, iar la pacienţii cu BRGE, forma erozivă alcătuieşte 52,27 ± 3,66 µmoli/l (tab.1). Concluzii 1) La pacienţii cu BRGE, în timpul perioadei de exacerbare există un nivel ridicat de oxid nitric în sucul gastric, mai mare decât la indivizii sănătoşi. 2) În forma mai severă a BRGE concentraţia metaboliţilor oxidului nitric este veridic mai sporită, ceea ce sugerează faptul că nivelul concentraţiei metaboliţilor oxidului nitric în sucul gastric este direct dependent de gradul de severitate al procesului

Уровень метаболитов окиси азота в сыворотке крови у больных с гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью

Department of Internal Medicine, Department of Family medicine, Nicolae Testemitanu State Medical and Pharmaceutical University, Congresul III al Medicilor de Familie din Republica Moldova, 17–18 mai, 2012, Chişinău, Republica Moldova, Conferinţa Naţională „Maladii bronhoobstructive la copii”, consacrată profesorului universitar, doctor habilitat Victor Gheţeul, 27 aprilie, Chişinău, Republica MoldovaIntroducere. Boala de reflux gastroesofagian (BRGE) este o afecţiune ce constituie aproximativ 75% din patologii ale esofagului şi este considerată o maladie, cauzată de revărsarea retrogradă a conţinutului gastric în esofag. BRGE cauzează un spectru larg de manifestări clinice, începând de la regurgitaţie, pirozis şi dureri epigastrale, fără leziuni endoscopic vizibile, până la esofagite erozive severe, complicate cu ulcer esofagian, stricturi şi metaplazie Barret. Patogenia BRGE este complicată. În dereglarea mecanismului antireflux veriga-cheie aparţine scăderii presiunii bazale ale SEI şi creşterea numărului de relaxaţii spontane ale lui, cauza cărora până în prezent rămâne nedeterminată. Este constatat faptul, că incapacitatea SEI (scăderea presiunii bazale) şi relaxarea spontană a esofagului sunt determinate de nivelul oxidului nitric. Aceste mecanisme sunt datorate inervaţiei neadrenergice necolinergice (NANC), în care oxidul nitric joacă rolul de neurotransmitere, fiind eliminat din NANC-neuroni intramurali [1, 2]. NO este o moleculă importantă de semnalizare care acţionează în aproape toate ţesuturile pentru a regla o gamă largă fiziologică [1, 2]. În organism NO rezultă din reacţia de transformare a L-argininei în L- citrulină, proces catalizat de NOS. Produsele finale ale NO în organism, formate prin reacţii de oxidare, sunt nitriţii (NO2 ) şi nitraţii (NO3 ) [5]. Stimularea NANC – neuronii intramurali este însoţită de sinteza NO, care pătrunde în stratul muscular şi activează guanilatciclaza solubilă, la rândul ei activează sinteza guanidinmonofosfat-ciclaza (cGMF). Creşterea nivelului de cGMF duce la scăderea nivelului de calciu în celule, diminuarea legăturii dintre miozină şi actină, astfel provocând relaxarea SEI [3, 4, 5]. Astfel, este necesar de a studia în continuare rolul metabolismului NO în patogenia BRGE. Material şi metode Scopul cercetării a fost de a determina nivelul metaboliţilor oxidului nitric în ser la pacienţii cu boala de reflux gastroesofagian în dependenţă de gradul de severitate al maladiei. În studiu au fost incluşi 46 de pacienţi cu boala de reflux gastroesofagian, dintre ei - 28 cu BRGE, formă nonerozivă şi 18 cu BRGE, formă erozivă, vârstă 20-60 de ani. Diagnosticul a fost confirmat în baza datelor clinico-anamnezice şi explorărilor instrumentale (FEGDS). Modificările concentraţiilor metaboliţilor NO au fost evaluate prin cercetarea în ser sanguin. Grupul de control alcătuit din 11 persoane, clinic şi endoscopic sănătoşi. Nivelul de metaboliţi NO în ser a fost determinat prin metoda colorimetrică. Rezultate şi discuţii Nivelul metaboliţilor oxidului nitric în grupul de control a alcătuit 76,02 ± 1,61 mcmoli/l. Se determină o creştere evidentă a concentraţiei metaboliţilor oxidului nitric la pacienţii cu BRGE. În grupul format din 28 de pacienţi cu BRGE, formă nonerozivă, concentraţia metaboliţilor NO a alcătuit 85,31 ± 3,99 mcmoli/l, iar în grupul de pacienţi cu BRGE, formă erozivă acest indice indică 97,35 ± 1,75 mcmoli/l (tab. 1). Concluzii La pacienţii cu BRGE se constată o concentraţie de nitriţi plasmatici mai înaltă, comparativ cu grupul de control. Concentraţia metaboliţilor oxidului nitric în serul sanguin este veridic mai înaltă la pacienţii cu BRGE, formă erozivă comparativ cu BRGE, formă nonerozivă

Роль мониторизированной 24-часовой рН–метрии в диагностике гастроэзофагеальной рефлюксной болезни

Department of Internal Medicine, Department of Family medicine, Department of General Surgery and semiology, Nicolae Testemitanu State Medical and Pharmaceutical University, Congresul III al Medicilor de Familie din Republica Moldova, 17–18 mai, 2012, Chişinău, Republica Moldova, Conferinţa Naţională „Maladii bronhoobstructive la copii”, consacrată profesorului universitar, doctor habilitat Victor Gheţeul, 27 aprilie, Chişinău, Republica MoldovaMonitored esophageal pH–methry is the „gold standard” in diagnosis of gastro esophageal reflux disease. The method allows the measuring of severity degree in reflux esophagitis and correcting antisecretory treatment.Мониторизированная 24-часовая рН-метрия является «золотым стандартом» в диагностике ГЭРБ. Метод дает возможность оценить степень тяжести рефлюксного эзофагита. Суточная рH–метрия позволяет определить дозу антисекреторных препаратов и констатировать эффективность проводимого лечения